覆蓋特級胎牛血清的主要應用場景,體現(xiàn)了其廣泛的適用性與重要性。
為發(fā)揮
特級胎牛血清的性能,需遵循規(guī)范的應用流程,核心要點如下:?
1.儲存與解凍:保障活性不流失?
儲存條件:未開封血清需在-20℃~-80℃避光保存,避免反復凍融(建議分裝為50mL/100mL單次用量,凍存后僅解凍1次);解凍后若暫不使用,可在2℃~8℃冰箱中存放不超過72小時,且不可再次冷凍。?
解凍操作:從冷凍室取出后,需在2℃~8℃冰箱中緩慢解凍(約12~24小時),或在室溫下自然解凍(避免37℃水浴快速解凍,防止營養(yǎng)成分變性);解凍后輕輕顛倒離心管5~8次,確保血清成分混勻,禁止劇烈搖晃。?
2.培養(yǎng)基配制:精準控制比例與無菌?
添加比例:根據(jù)細胞類型調(diào)整,干細胞培養(yǎng)通常添加10%~20%,敏感原代細胞可提升至20%~30%,具體需參考細胞系說明書;配制時需在生物安全柜內(nèi)操作,避免污染。?
兼容性測試:更換新批次特級胎牛血清前,需先進行“小劑量試用”——取少量血清配制培養(yǎng)基,培養(yǎng)目標細胞1~2個傳代周期,觀察細胞形態(tài)、增殖速率、存活率是否與原批次一致,確認無異常后再大規(guī)模使用。?
3.使用過程:避免浪費與污染?
避免反復開封:開封后的血清瓶需盡快使用,每次取用后及時擰緊瓶蓋,防止血清接觸空氣導致污染或水分揮發(fā);若發(fā)現(xiàn)血清出現(xiàn)渾濁、絮狀物、顏色異常(如深黃、發(fā)紅),需立即丟棄,不可使用。?
與其他成分適配:若培養(yǎng)基中需添加抗生素(如青霉素-鏈霉素)、生長因子,需確認其與特級胎牛血清無拮抗作用;建議先將血清與基礎培養(yǎng)基混勻,再加入其他添加劑,避免高濃度添加劑直接接觸血清導致成分破壞。?
